hPSC-多巴胺能神经元定向分化-iPSC重编程与定向分化-技术服务-中盛溯源
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hPSC-多巴胺能神经元定向分化


中盛溯源根据客户需求,提供定制化的hPSC-多巴胺能神经元定向分化服务(例如遗传疾病患者hPSC-多巴胺前体细胞的定制)。

中盛溯源生物科技有限公司掌握了稳定高效的hPSC-多巴胺前体细胞定向分化技术,适用于从人类多能干细胞(hPSC)定向分化为高纯度的多巴胺前体细胞(>90% Lmx1a+/ Foxa2+/ En1+)。

分化获得的多巴胺能神经前体细胞可应用于神经退行性疾病的科学研究,药物筛选,以及帕金森疾病模型的细胞移植。

我们以严格的质量标准完成制备、鉴定、储存、包装、物流等服务环节,满足客户的科研要求,保证后续实验的重复性和可靠性。

具体信息可参考Nuwacell™ hPSC-多巴胺前体细胞分化试剂盒和Nuwacell™ hPSC-多巴胺前体细胞的说明,并拨打400-888-3920详细咨询。


1、分化详细流程图


Nuwacell™ hPSC-多巴胺能神经前体细胞分化试剂盒分化流程图。


2、分化过程中细胞形态图示


Nuwacell™  hPSC-多巴胺能神经元分化试剂盒分化过程中细胞形态图示。

图示为DAY  0启动分化时的hPSC,DAY  11收获的mDAP(多巴胺能神经前体细胞),

DAY 12维持培养的mDAP,DAY 45的mDAN(成熟多巴胺能神经元)。标尺:200μm。


3、hPSC来源多巴胺能前体细胞(mDAP)特异性标志物检测


Nuwacell™ hPSC-多巴胺能神经前体细胞分化试剂盒分化的mDAP细胞荧光图示。

Lmx1a,Foxa2,En1为mDAP的特异性标志物,免疫荧光染色检测。标尺:200μm。


Nuwacell™  hPSC-多巴胺能神经前体细胞分化试剂盒分化的mDAPs特异性标志物检测。

图A为RT-qPCR检测;NKX2.1为间脑标记物、DBX1为中脑前端标志物;LMX1a、FOXA2、EN1、OTX2为中脑标志物,GBX2为后脑标志物。图B为流式细胞法检测。


4、hPSC来源成熟多巴胺能神经元(mDAN)特异性标志物和功能检测


hPSC来源的成熟中脑多巴胺能神经元(mDAN,DAY 40)细胞荧光图示。

TH和Nurr1共表达为mDAN的特异性标志物,免疫荧光染色检测。标尺:200μm。


hPSC来源的成熟中脑多巴胺能神经元(mDAN,DAY 45)多巴胺释放水平检测结果,多巴胺释放>2000pg/mL。

对照组为hPSC(正常细胞多巴胺释放为0-100pg/mL),放射性免疫法检测。


Nuwacell™ hPSC-多巴胺能神经前体细胞分化为成熟的中脑多巴胺能神经元(mDAN,DAY 45)的膜片钳测试结果。
选取符合形态特征的mDAN进行膜片钳测试,可检测到较稳定的2-10Hz的节律性自发放电。标尺:20μm。