hiPSC-Luc-GFP细胞株-多能干细胞类-细胞类产品-中盛溯源
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hiPSC-Luc-GFP细胞株


Rosa26位点是常用的基因敲入位点;敲入该位点的基因表达活性高,对旁侧基因影响较小。利用CRISPR基因编辑技术,可将外源的基因片段定点插入到Rosa26位点,实现外源基因的稳定高表达。

Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株是由中盛溯源商品化hiPSC细胞株(RC01001-A)制得,利用CRISPR基因编辑技术,将Luc和GFP等基因片段定点插入到Rosa26位点,细胞可以高效的表达Luciferase和GFP,可在Nuwacell™ 科研级hPSC培养体系中长期稳定快速增殖,具有与人类胚胎干细胞(hESC)高度类似的克隆形态和基因表达,长期维持正常核型,并在体外(in vitro)和体内(in vivo)都具有完备的三胚层分化潜能。适合科研用途的干细胞研究和应用


Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株优势


✔ 稳定性高,后代表达一致

✔ 外源基因表达不受旁侧基因影响,最大程度减少了对内源性基因的影响




1、细胞敲入基因信息


Nuwacell™ 科研级hiPSC-Luc-GFP细胞株Rosa 26 位点敲入基因信息示意图。


2、细胞形态与生长情况


连续培养的Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)细胞形态图示。荧光倒置显微镜图示。
图A、B为正常传代DAY 2细胞图示,C、D为正常传代DAY 3细胞图示。标尺:100μm。


3、细胞GFP阳性率检测


连续培养的Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)GFP阳性率检测,GFP表达阳性。
上图为流式细胞分析结果,浅灰色线条为hiPSC阴性对照;黑线为hiPSC-Luc-GFP细胞株的GFP阳性率结果。


4、细胞荧光素酶(Luciferase)活性检测


Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)荧光素酶(Luciferase)活性检测结果。
上图为RLU(相对荧光强度)分析结果,其中阴性对照为普通hiPSC,hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)的荧光素酶(Luciferase)报告基因表达阳性。


5、细胞表面标志物检测


Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)细胞表面标志物检测结果。

上图为流式细胞分析结果,其中浅灰色线条为同种抗体阴性对照,黑线为hiPSC细胞表面标志物抗体。


6、细胞多能基因检测


Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)细胞多能基因检测结果。

上图为qRT-PCR分析结果,POU5F1与NANOG为细胞多能基因。


7、细胞染色体核型检测


Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)细胞核型检测结果:46,XY。

结果解释:G显带,计数20个分裂相,核型分析5个,未发现染色体数目或结构异常。


8、细胞分化潜能检测


Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)细胞在免疫缺陷小鼠体内形成畸胎瘤。

E、F、G分别为神经组织(外胚层)、软骨组织(中胚层)、肠上皮组织(内胚层),成瘤时间8周。标尺:100μm。